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    上海百蕊生物科技有限公司

    主營:elisa試劑盒
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    [供應]人elisa試劑盒現(xiàn)貨銷售
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    • 產(chǎn)品產(chǎn)地:上海省上海市金山區(qū)亭林金展路2229號
    • 產(chǎn)品品牌:R&D,GENOMIC等
    • 包裝規(guī)格:無
    • 產(chǎn)品數(shù)量:100
    • 計量單位:盒
    • 產(chǎn)品單價:1200
    • 更新日期:2015-12-11 10:14:09
    • 有效期至:2016-12-10
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    人elisa試劑盒現(xiàn)貨銷售 詳細信息



    人elisa試劑盒現(xiàn)貨銷售
    elisa試劑盒組成:
    試劑盒組成
    說明書
    1份
    封板膜
    2片
    密封袋
    1個

    酶標包被板
    標準品
    0.5ml×1瓶
    標準品稀釋液
    1.5ml×1瓶
    酶標試劑
    3 ml×1瓶
    樣品稀釋液
    3 ml×1瓶

    顯色劑A液
    3 ml×1瓶
    顯色劑B液
    3 ml×1瓶

    終止液
    3ml×1瓶

    濃縮洗滌液
    20ml×1瓶

    elisa試劑盒自備材料:
    1. 酶標儀。
    2. 自動或者手工洗板機。
    3. 恒溫箱。
    4. 可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,最好用多通道移液器。
    5. 干凈的試管和Eppendof管。

    elisa試劑盒操作步驟:
    1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照圖表在小試管中進行稀釋。
    2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、 待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl, 然后再加待測樣品 10μl(樣品最終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡 量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
    3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
    4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
    5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此
    重復 5 次,拍干。
    6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
    7.溫育:操作同 3。
    8.洗滌:操作同 5。
    9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
    15 分鐘.
    10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
    11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進行。

    elisa試劑盒標準曲線的繪制注意事項:
    1、樣品的濃度等指標是根據(jù)標準曲線計算出來的,所以首先要把做標準曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事,否則后面的實驗結(jié)果無從談起。
    2、設置標準曲線樣品的標準濃度范圍要有一個比較大的跨度,并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度,即樣品的濃度要在標準曲線濃度范圍之內(nèi),包括上限和下限。而對于呈S型的標準曲線,盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度最陡段,即曲線幾乎成直線的范圍內(nèi)。
    3、最好采用倍比稀釋法配制標準曲線中的標準樣品濃度,ELISA試劑盒這樣就能夠保證標準樣品的濃度不會出現(xiàn)較大的偏離。
    4、檢測標準樣品時,應按濃度遞增順序進行,以減少高濃度對低濃度的影響,提高準確性。
    5、標準曲線的樣品數(shù)一般為7個點,但至少要保證有5個點。
    6、做出的標準曲線相關系數(shù)因?qū)嶒炓蟛煌兴儎?,但一般來說,相關系數(shù)R至少要大于0.98,對于有些實驗,至少要0.99甚至是0.999.

    elisa試劑盒標準曲線選擇什么擬合方程:

    1.在S曲線的低濃度部門可以用乘冪方程很好的擬合,中低濃度部門可以用直線方程,中間部門可用對數(shù)方程,而中后段可用四參數(shù)。免疫檢測時尺度點(可以是倍比稀釋的,也可以不是)濃度假如和相應的吸光度(OD)值假如能夠呈現(xiàn)直線關系當然是最理想的了,這時可以通過EXELL等利便的獲得擬合曲線,進而推算出樣品的濃度值。

    2.關于尺度曲線的擬合方式,直線、二次曲線、三次曲線、指數(shù)、對數(shù)等雖都可用于ELISA及其它生物學反應中的曲線擬合,但都只合用于曲線的一部門,有的合用于前半段,有的合用于后半段,有的合用于中間一段,而Logistic曲線則對曲線的全部都有較好的合用性。

    3.在一個長的區(qū)間內(nèi),Logistic應該都能擬合得較為理想。假如用來定量,S形曲線的中間段(較陡處)是比較好的,而兩真?zhèn)€平坦部門計算誤差會大,有時甚至會很大。用于免疫檢測的所謂“尺度曲線"實在稱為擬合曲線比較合適。目前國際上最流行的免疫檢測擬合方



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